https://3rabica.org/index.php?action=history&feed=atom&title=%D8%AA%D8%AD%D9%84%D9%84_%D8%A5%D8%AF%D9%85%D8%A7%D9%86تحلل إدمان - تاريخ المراجعة2026-06-12T07:43:02Zتاريخ التعديل لهذه الصفحة في الويكيMediaWiki 1.43.7https://3rabica.org/index.php?title=%D8%AA%D8%AD%D9%84%D9%84_%D8%A5%D8%AF%D9%85%D8%A7%D9%86&diff=3266994&oldid=prevعبد العزيز: بوت:صيانة المراجع2023-01-24T01:46:08Z<p>بوت:صيانة المراجع</p>
<p><b>صفحة جديدة</b></p><div>{{مقالة غير مراجعة|تاريخ = أغسطس 2020}}<br />
{{يتيمة|تاريخ=أغسطس 2020}}<br />
'''تحلل إدمان''' ، الذي طوره بير إدمان، هو طريقة [[تسلسل البروتين|لتسلسل]] [[حمض أميني|الأحماض الأمينية]] في [[ببتيد|الببتيد]] . <ref>{{استشهاد بدورية محكمة|الأخير=Edman|الأول=P.|سنة=1950|عنوان=Method for determination of the amino acid sequence in peptides|صحيفة=Acta Chem. Scand.|المجلد=4|صفحات=283–293|DOI=10.3891/acta.chem.scand.04-0283|الأخير2=Högfeldt|الأول2=Erik|الأخير3=Sillén|الأول3=Lars Gunnar|الأخير4=Kinell|الأول4=Per-Olof}}</ref> في هذه الطريقة، يتم تمييز [[بقية (كيمياء)|البقايا]] الأمينية الطرفية وتقسيمها من الببتيد دون تعطيل [[رابطة ببتيدية|روابط الببتيد]] بين بقايا الأحماض الأمينية الأخرى.<br />
<br />
== آلية ==<br />
[[ملف:EdmanDegradation.png|مركز|600x600بك| تدهور إدمان بسلسلة ببتيد الأحماض الأمينية العامة.]]<br />
يتفاعل فينيل أيزوثيوسيانات مع مجموعة أمينية غير مشحونة، تحت ظروف قلوية معتدلة، لتشكيل مشتق ''فينيل ثيوكاربامويل'' دوري. ثم، في ظل الظروف [[حمض|الحمضية]] ، يتم شق هذا المشتق من الحمض الأميني النهائي كمشتق ثيازولينون. يتم بعد ذلك استخلاص الحمض الأميني ثيازولينون بشكل انتقائي في مذيب عضوي ومعالجته بالحمض لتكوين مشتق من الأحماض الأمينية الفينيل ثيوهيدانتوين (PTH) الأكثر استقرارًا والذي يمكن تحديده باستخدام [[استشراب|الكروماتوجرافيا]] أو [[رحلان كهربائي|الرحلان الكهربائي]] . يمكن بعد ذلك تكرار هذا الإجراء مرة أخرى لتحديد الحمض الأميني التالي. العائق الرئيسي لهذه التقنية هو أن الببتيدات التي يتم تسلسلها بهذه الطريقة لا يمكن أن تحتوي على أكثر من 50 إلى 60 وحدة بنائية (وعمليًا، أقل من 30). طول الببتيد محدود بسبب الاشتقاق الدوري لا يكتمل دائمًا. يمكن حل مشكلة الاشتقاق عن طريق شطر الببتيدات الكبيرة إلى ببتيدات أصغر قبل متابعة التفاعل. إنه قادر على [[متتالية|تسلسل]] ما يصل إلى 30 من [[حمض أميني|الأحماض الأمينية]] بدقة باستخدام آلات حديثة قادرة على كفاءة تزيد عن 99٪ لكل [[حمض أميني]] . تتمثل ميزة تدهور Edman في أنه يستخدم فقط [[بيكو|10-100 بيكو مول]] من [[ببتيد|الببتيد]] لعملية التسلسل. تمت أتمتة تفاعل تدهور Edman في عام 1967 بواسطة Edman and Beggs لتسريع العملية <ref>{{استشهاد بدورية محكمة|صحيفة=Eur. J. Biochem.|تاريخ=March 1967|المجلد=1|العدد=1|صفحات=80–91|عنوان=A protein sequenator|الأخير=Edman P, Begg G|PMID=6059350|DOI=10.1111/j.1432-1033.1967.tb00047.x}}</ref> وتم استخدام 100 جهاز آلي في جميع أنحاء العالم بحلول عام 1973. <ref>{{استشهاد بدورية محكمة|الأخير=Niall HD|عنوان=Automated Edman degradation: the protein sequenator|صحيفة=Meth. Enzymol.|المجلد=27|العدد=|صفحات=942–1010|سنة=1973|PMID=4773306|DOI=10.1016/S0076-6879(73)27039-8|مسار=|سلسلة=Methods in Enzymology|ISBN=978-0-12-181890-6}}</ref><br />
<br />
== محددات ==<br />
نظرًا لأن تحلل Edman ينشأ من النهاية الأمينية للبروتين، فلن يعمل إذا تم تعديل النهاية الأمينية كيميائيًا (على سبيل المثال عن طريق [[أستلة|الأسيتيل]] أو تكوين حمض البيروجلوتاميك ). سيتوقف التسلسل إذا تمت مصادفة حمض أميني في الكربون ألفا ,(مثل حمض isoaspartic ) ، حيث لا يمكن تكوين الحلقة الوسيطة المفضلة المكونة من خمسة أعضاء. لا يعد تدهور Edman مفيدًا بشكل عام لتحديد مواقع جسور ثاني كبريتيد. يتطلب أيضًا كميات من الببتيد من 1 بيكومول أو أعلى للحصول على نتائج ملحوظة.<br />
<br />
== التحليل المزدوج ==<br />
بعد 2D SDS PAGE ، يمكن نقل البروتينات إلى غشاء لطخة بولي فينيلدين ديفلوريد (PVDF) لمزيد من التحليل. يمكن إجراء تحلل Edman مباشرة من غشاء PVDF. قد يكون تسلسل المخلفات النهاية الأمينية الذي ينتج عنه خمسة إلى عشرة أحماض أمينية كافياً لتحديد بروتين المطلوب (POI).<br />
<br />
== انظر أيضا ==<br />
<br />
* [[تفكك بيرغمان|تدهور بيرجمان]]<br />
* كلوريد دانسيل<br />
<br />
== المراجع ==<br />
{{مراجع}}<br />
{{شريط بوابات|الكيمياء|علم الأحياء الخلوي والجزيئي}}<br />
{{روابط شقيقة}}<br />
<br />
[[تصنيف:اختبارات كيميائية]]<br />
[[تصنيف:بروتيوميات]]<br />
[[تصنيف:بنية البروتين]]<br />
[[تصنيف:تفاعلات عضوية]]<br />
[[تصنيف:تفاعلات كيميائية حسب الاسم]]<br />
[[تصنيف:علم الأحياء الجزيئي]]</div>عبد العزيز